ABI PCR仪的操作注意事项
点击次数：641 更新时间：2020-02-24
ABI PCR仪利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内In Vitro的大量合成，基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。目前，常用的技术，可以将一段基因复制为原来的一百亿至一千亿倍。根据DNA扩增的目的和检测的标准，可以将ABI PCR仪分为普通ABI PCR仪，梯度ABI PCR仪，原位ABI PCR仪，实时荧光定量ABI PCR仪四类。
尽管扩增序列的残留污染大部分是假阳性反应的原因，样品间的交叉污染也是原因之一。因此，不仅要在进行扩增反应是谨慎认真，在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意：
1、操作多份样品时，制备反应混合液，先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好，然后分装，这样即可以减少操作，避免污染，又可以增加反应的精确度；
2、戴一次性手套，若不小心溅上反应液，立即更换手套；
3、避免反应液飞溅，打开反应管时为避免此种情况，开盖前稍离心收集液体于管底。若不小心溅到手套或桌面上，应立刻更换手套并用稀酸擦拭桌面；
4、加入反应模板，加入后盖紧反应管；
5、使用一次性吸头，严禁与PCR产物分析室的吸头混用，吸头不要长时间暴露于空气中，避免气溶胶的污染；
6、操作时设立阴阳性对照和空白对照，即可验证PCR反应的可靠性，又可以协助判断扩增系统的可信性；
7、尽可能用可替换或可高压处理的加样器，由于加样器较容易受产物气溶胶或标本DNA的污染，建议使用可替换或高压处理的加样器。
8、重复实验，验证结果，慎下结论。
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